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2010~2021年中国和全球喉癌发病与死亡变化趋势:基于全球疾病负担数据库
廖红明, 何本超, 陈绪清, 秦亮
摘要717)      PDF (1783KB)(73)   
目的 分析2010~2021年中国及全球喉癌疾病负担的变化趋势,为制定喉癌防治策略提供依据。方法 基于全球疾病负担(Global burden of disease,GBD)研究数据库,分析2010~2021年中国与全球喉癌患者的年龄标准化发病率(agestandardized incidence rate,ASIR)、年龄标准化患病率(age-standardized prevalence rate,ASPR)、年龄标准化死亡率(age-standardized mortality rate,ASMR)及伤残调整寿命年(disability adjusted life years,DALYs),进一步分析我国不同年龄段、性别的喉癌疾病负担情况。所有率采用GBD估计的世界标准人口结构进行标化,使用Joinpoint 4.9.1.0软件计算年度变化百分比(annual percentage change,APC),所有图像均使用RStudio绘制。结果 2010~2021年,中国喉癌患病人数由13.43万例增至21.78万例,增长62.18%,同期全球增幅为27.18%。全球ASPR下降,中国ASPR上升,平均年度变化百分比(average annual percentage change,AAPC)为1.2%;中国喉癌死亡人数由1.57万例增至1.98万例,增长26.11%,同期全球增幅为19.21%。中国和全球ASMR均下降,AAPC分别为-1.5%和-1.2%。男性喉癌患者发病率和患病率显著高于女性,年龄段变化较为一致,2021年中国和全球喉癌的高发年龄组均为65~69岁。预测到2031年,中国男性喉癌发病率为3.27/10万,女性为0.59/10万,死亡率分别为1.70/10万和0.31/10万。结论 2010~2021年期间,我国喉癌ASIR呈上升趋势,这提示需要加强喉癌的预防、早期筛查和治疗工作。
2025, 32 (10): 624-.
尘螨鼻激发试验临床标准化操作流程的建立及评价[论著]
张钰, 宋昱, 张旭, 李景云, 锡琳, 张媛, 张罗
本期封面
摘要119)      PDF (262KB)(45)   
2024, 31 (10): 680-.
从“单纯切除”到“功能重塑”的跨越:H-UPPP的创立与临床应用
韩德民
摘要65)      PDF (1405KB)(40)   
2026, 33 (1): 41-.
基于甲状腺乳头状癌颈侧区大容量淋巴结转移危险因素、分布特征及预后的清扫策略
郑泽, 陈翔
摘要293)      PDF (724KB)(38)   
目的 探讨甲状腺乳头状癌(PTC)颈侧区淋巴结转移(LNM)及颈侧区大容量淋巴结转移(Lv-LNM,转移数目>5枚)的危险因素、分布特征及预后意义。方法 回顾性分析2017年1月~2024年8月156例cN1b期PTC患者的临床资料,通过单因素及多因素回归分析颈侧区LNM与颈侧区Lv-LNM的危险因素,采用Kaplan-Meier法比较不同转移负荷患者的无复发生存期(RFS)。结果 颈侧区LNM及Lv-LNM发生率分别为73.7%和22.4%。多因素分析显示,肿瘤直径>10 mm、甲状腺上极病灶及中央区LNM是颈侧区LNM的独立危险因素;年龄≤45岁、肿瘤直径>10 mm、甲状腺上极病灶及中央区Lv-LNM是颈侧区Lv-LNM的独立危险因素。颈侧区LNM主要分布于Ⅲ区和Ⅳ区,颈侧区Lv-LNM以Ⅱ+Ⅲ+Ⅳ区三区转移为主。中位随访36个月,10例复发,5年无复发生存率为87.7%。生存分析显示,高淋巴结转移负荷(Lv-LNM)是影响无复发生存率的重要因素(χ²=3.949,P =0.047),其影响在颈侧区尤为显著(χ²=7.144,P =0.007)。结论 肿瘤直径、位置及中央区转移是颈侧区LNM的独立危险因素,年龄(≤45岁)、高负荷中央区转移进一步增加颈侧区Lv-LNM风险。颈侧区Lv-LNM多表现为多区域累及,且显著降低生存预后。针对高危患者,建议扩大清扫范围或行改良根治性颈清扫以改善患者远期预后。
2025, 32 (10): 613-.
下调SMAD2/3表达对鼻咽癌细胞放疗和化疗敏感性的影响研究
胡映, 乐炜, 张胜伟, 程正, 李小利, 陈清杰
摘要194)      PDF (2903KB)(32)   
目的 探讨下调转录因子SMAD2/3的表达对鼻咽癌细胞放疗和化疗敏感性的影响及可能的分子机制。方法 通过组织免疫荧光染色检测SMAD2和SMAD3蛋白在鼻咽癌组织和癌旁组织中的表达水平,Western blot和qRT-PCR检测其在人鼻咽癌细胞系(CNE-2、5-8F、HONE1、HK-1)和人正常鼻咽黏膜上皮细胞(HNEpC、NP69)中的表达水平。通过慢病毒转染细胞的方法构建稳定敲低SMAD2/3的CNE-2细胞株(shSMAD2/3组)和其对照细胞株(shSMAD2/3-NC组)。对转染后的细胞分别进行4 Gy照射、10 μmol/L顺铂化疗、4 Gy照射+10 μmol/L顺铂化疗联合处理,通过克隆形成试验检测细胞增殖活性,划痕试验检测细胞迁移能力,Transwell试验检测细胞侵袭能力,Western blot检测PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平。加入PI3K激动剂740 Y-P进行回复实验。结果 SMAD2和SMAD3蛋白在鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞系中均高水平表达。与shSMAD2/3-NC组细胞相比,shSMAD2/3组细胞对放疗和化疗敏感性均显著增强,细胞增殖、细胞迁移和侵袭能力均受到显著抑制,PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平显著降低(P 均<0.05)。740 Y-P显著提升shSMAD2/3组细胞PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平,有效逆转SMAD2/3敲低对细胞活性的抑制,降低细胞对放疗和化疗敏感性(P 均<0.05)。结论  SMAD2/3在鼻咽癌中高表达,下调SMAD2/3表达通过降低PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平而增加鼻咽癌细胞株对放疗和化疗的敏感性。
2024, 31 (12): 749-.
336例头颈部腺样囊性癌术后放疗剂量与预后相关分析
武骏, 赵茜, 周晶, 马廷耀, 张姝晶, 杨国梁, 陈晓红
摘要408)      PDF (828KB)(31)   
目的 探讨术后辅助放疗(postoperative radiotherapy, PORT)对头颈部腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)患者局部控制及生存结局的影响,明确剂量优化策略的临床价值。方法 回顾性分析2015年1月~2021年1月就诊于北京同仁医院的336例接受手术联合PORT的ACC患者资料,按放疗剂量分为高剂量组(>60 Gy,n=146例)和低剂量组(≤60 Gy,n=190例),采用Kaplan-Meier法、Log-rank检验及多因素Cox回归模型分析剂量与预后的关联。结果 全组患者局部控制失败累计发生率为39.29%(132/336)。术后1、3、5年总生存率分别为98.81%、94.05%、90.48%。剂量效应分析显示,>60 Gy组局部复发率显著低于≤60 Gy组(28.08% vs. 47.89%,P <0.001);复发风险下降41.37%(校正HR=0.59,95%CI =0.38~0.91,P =0.041);高剂量组3年及5年无进展生存率分别为86.99%、82.19%,显著优于低剂量组(76.32%、66.32%,P 均<0.05),但总生存率差异无统计学意义(P =0.292)。结论 头颈部ACC术后放疗剂量强化至>60 Gy可显著降低局部复发风险,提升3年及5年无进展生存率,但未转化为总生存获益。
2025, 32 (5): 273-.
鼻内镜下鼻底巨大鼻腭囊肿揭盖术1例
王中祎, 吴健有, 王向东, 张罗
摘要167)      PDF (1035KB)(30)   
2024, 31 (11): 747-.
喉软骨肉瘤预后相关因素分析
丁硕, 黄志刚, 房居高, 钟琦, 张洋, 侯丽珍, 郭伟
摘要315)      PDF (628KB)(30)   
目的 研究喉软骨肉瘤的预后影响因素,深入分析其临床数据,为更好的治疗喉软骨肉瘤提供理论依据。方法 回顾性分析2010年1月~2024年12月首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科收治的原发喉软骨肉瘤患者完整临床资料。结果 共纳入15例患者,其中男性11例,女性4例,性别比例为11∶4,平均发病年龄为57.3岁,平均临床症状时间为12.2个月。肿瘤位置:11例患者肿瘤主要位于环状软骨,2例位于杓状软骨,2例位于甲状软骨。肿瘤病理分级:7例患者为Ⅰ级,8例患者为Ⅱ级。治疗方式:4例患者行经口激光微创手术,2例行喉部分切除+气管切开,9例行喉全切除手术/颈部淋巴结清扫+气管造瘘术。患者5年总体生存率为85.7%,5年疾病特异性生存率为100%,5年局部区域控制率为90.9%。喉软骨肉瘤患者性别、肿瘤位置、肿瘤分级、Ki-67、肿瘤大小以及是否保喉的手术不影响局部区域控制率和疾病特异性生存率。结论  喉软骨肉瘤一般病史较长不易被发现,病理多为分化较好的类型,区域性或远处转移罕见,长期生存率良好。手术切除是首选治疗方式,在不降低肿瘤控制率的基础上应优先考虑保留喉部功能手术,而综合治疗一般不推荐。
2025, 32 (4): 205-.
颈部间隙感染合并纵隔脓肿的临床特点及预后影响因素分析
魏兴梅, 黄志刚, 李平栋, 杨劲松, 柯冀, 余振, 高翔, 陈晓红, 于磊, 杨征
摘要90)      PDF (857KB)(30)   
目的 颈部间隙感染合并纵隔脓肿是一种病情凶险、死亡率较高的感染性疾病,通常由头颈部感染扩散至纵隔引起,本研究拟通过病例分析探讨这一疾病预后的影响因素。方法 回顾性分析2024年5月~2025年6月首都医科大学附属北京同仁医院收治的5例颈部间隙感染合并纵隔脓肿患者的诊疗过程,探讨影响预后的关键因素。结果 3例患者经过颈部联合纵隔脓肿引流术和敏感抗生素治疗后痊愈,2例患者入院后因全身情况差、肺部感染严重、氧合不能维持入住重症监护室,行胸腔闭式引流,后感染扩散引起脓毒血症、多脏器功能衰竭而死亡。其中预后较好的3例患者均没有糖尿病,2例年轻患者(42和44岁)、G+菌感染且脓肿范围较局限,而另外2例预后较差的患者均为高龄(70岁及以上)、G-菌感染且脓肿范围广泛。结论 高龄(>70岁)、合并糖尿病、脓肿范围广泛(尤其是累及下纵隔和后纵隔)以及G-菌感染是预后不良的主要因素。多学科合作模式下,强化气道管理、早期手术干预及基于药敏的精准抗感染治疗是改善预后的关键。
2026, 33 (1): 1-.
难治性鼻出血的临床分析
陈柳, 孙含青, 周汝环, 张雁冰, 李坤军, 曹峰
摘要172)      PDF (747KB)(29)   
目的 探讨难治性鼻出血的出血部位、临床特点、治疗方法及疗效。方法 回顾性分析因难治性鼻出血入院治疗的127例患者的临床资料,分析常见的出血部位、临床特点、疗效等。结果 127例患者中不同年龄段(P =0.000)、是否合并高血压2、3级(P =0.030)、是否长期口服抗凝药(P =0.000)患者出血部位差异具有统计学意义。入组患者中,二次止血成功患者14例。二次止血患者中,高血压2、3级患者与高血压1级和不合并高血压患者一次治愈率差异有统计学意义(P =0.000)。结论 难治性鼻出血患者中男性患者多于女性,常见出血部位与年龄,高血压2、3级及长期口服抗凝药有关,鼻内镜下电凝止血是首选治疗方法,血压高低与电凝止血治愈率有关,血压控制不佳患者需同时积极控制血压。
2024, 31 (9): 585-.
儿童青少年分化型甲状腺癌的淋巴结转移:一项基于多中心数据的预测模型
姚依松, 陈曦, 李东宪, 王海廷, 李玉梅, 宋西成
摘要146)      PDF (1473KB)(28)   
目的 分析儿童青少年分化型甲状腺癌(pediatric differentied thyroid carcinoma,pDTC)患者淋巴结转移影响因素,并构建预测模型。方法 整合4个队列,包括来自美国国家癌症研究所监测、流行病学及最终结果(SEER)数据库的内部训练队列(1 419例)及内部验证队列(609例)、TCGA-pDTC队列(来自癌症基因图谱TCGA数据库的20例患者)与YHD-pDTC队列(来自真实世界的39例患者)。在内部训练队列中通过最小绝对收缩和选择算子(Lasso)联合Logistic回归在存在和剔除T分级的情况下分别筛选pDTC患者淋巴结转移的影响因素,并构建列线图。在其余三个队列中利用校准曲线、受试者工作特征(ROC)曲线、ROC曲线下面积(AUC)和决策曲线(DCA)用于评价模型性能。结果 多因素Logistic回归结果显示组织学类型[OR(95%CI)为0.020(0.010~0.060),P <0.001]、M分级[OR(95%CI)为29.550(3.190~273.490),P =0.003]、T分级[OR(95%CI)为2.210(1.820~2.680),P <0.001]是pDTC患者淋巴结转移的影响因素。内部训练集、内部验证集、YHD-pDTC队列与TCGA-pDTC队列AUC依次为0.734(0.709,0.758)、0.752(0.716,0.788)、0.969(0.920,1)、0.600(0.342,0.858),校准曲线接近完美参考线。T分级对pDTC患者淋巴结转移的预测能力好于包膜外浸润与肿瘤大小(AUC=0.691)。结论 组织学类型、M分级、T分级是预测pDTC患者淋巴结转移的危险因素,据此建立的列线图可对pDTC患者局淋巴结转移进行个体化预测。
2025, 32 (9): 545-.
《中国耳鼻咽喉头颈外科》杂志稿约
摘要57)      PDF (288KB)(28)   
2026, 33 (1): 59-.
杭州市外耳道真菌病病原菌分布及药物敏感性分析
刘丹青, 何晓, 孙延文, 唐旭霞
摘要227)      PDF (1203KB)(27)   
目的 分析杭州市外耳道真菌病患者的临床特征、病原菌分布及药物敏感性,为外耳道真菌病的规范治疗提供帮助。方法 收集2022年12月~2024年2月于浙江中医药大学附属第一医院诊治的115例鼓膜完整的外耳道真菌病患者耳部分泌物进行培养,通过形态学检查和质谱检测鉴定病原菌种类。采用真菌药敏板进行药敏实验。所有患者均在耳内镜下清理耳道联合局部注药。结果 本地区外耳道真菌病常见致病菌以土曲霉为主(60.8%)。药敏结果可见土曲霉对泊沙康唑、伏立康唑和伊曲康唑均敏感,对其余6种药物存在不同程度耐药。纳入115例患者治疗总有效率达93%。结论 本地区外耳道真菌病病原菌以土曲霉为主,其对泊沙康唑、伏立康唑和伊曲康唑等唑类抗真菌药物敏感,可作为临床治疗首选。
2024, 31 (8): 501-.
142例GJB2双等位基因突变患儿基因型与听力表型的差异分析
阮宇, 文铖, 程晓华, 张伟, 谢锦各, 李悦, 邓琳, 黄丽辉
摘要308)      PDF (481KB)(26)   
目的 分析GJB2双等位基因突变患儿不同基因型的听力表型差异,为临床提供参考。方法 2012年8月~2024年3月在首都医科大学附属北京同仁医院确诊为GJB2双等位基因突变患儿142例,所有患儿均接受新生儿听力筛查、耳聋基因筛查及听力诊断检查。根据突变位点类型分为三组,分别为T/T组(截断/截断突变,59例)、T/NT组(截断/非截断突变,50例)及NT/NT组(非截断/非截断突变,33例),分析三组基因型、新生儿听力筛查结果、首诊月龄及听力诊断结果。结果  T/T组基因型以c.235delC/c.235delC为主(57.63%),T/NT组以c.235delC/c.109G>A为主(74.00%),NT/NT组以c.109G>A/c.109G>A为主(96.97%)。新生儿听力筛查未通过率为80.28%,其中T/T组未通过率89.83%,显著高于T/NT组70.00%(P =0.009)。首诊月龄为(3.70±1.56)个月,三组差异无统计学意义(P >0.05)。142例中,确诊听力损失104例(73.24%),听力正常38例(26.76%);T/T组听力损失占比100.00%,显著高于T/NT组52.00%(P <0.001)及NT/NT组57.58%(P <0.001)。听力损失侧别,104例中,双侧听力损失86例(82.69%),单侧听力损失18例(17.31%);T/T组双侧听力损失占比100.00%,显著高于T/NT组57.69%(P <0.001)及NT/NT组63.16%(P <0.001)。听力损失104例(190耳)中,听力损失程度以轻度至中度为主(63.16%),其次为极重度(24.74%)及重度(12.10%)。其中T/T组以重度至极重度听力损失为主(58.47%),T/NT组及NT/NT组均以轻度听力损失为主(58.54%及74.19%),差异具有统计学意义(P <0.001)。结论 本研究T/T组所有患儿首诊均确诊为双侧听力损失,以重度及极重度听力损失为主;T/NT组及NT/NT组首诊确诊双侧或单侧听力损失分别为52.00%及57.58%,以轻度听力损失为主。
2024, 31 (9): 569-.
中国健康与养老追踪调查中睡眠时长轨迹与听力损失关联研究
廖红明, 何本超, 操金华, 秦马力
摘要63)      PDF (847KB)(26)   
目的 基于中国健康与养老追踪调查(China Health and Retirement Longitudinal Study,CHARLS)数据,探讨社区人群睡眠时长轨迹与听力损失的关联。方法 纳入2011~2018年CHARLS四期调查数据,采用组轨迹模型(group-basedtrajectory model,GBTM)识别睡眠时长轨迹类型,并运用Logistic回归分析不同轨迹与听力损失的关联,调整人口学因素及代谢相关混杂因素。结果 轨迹模型拟合指标随轨迹数增加逐渐下降,但五轨迹模型平均后验概率(average posterior probability,APP)<0.7,综合信息准则变化幅度,最终确定3轨迹模型。GBTM将睡眠时长分为健康睡眠增长组(583例)、持续睡眠短睡组(1 175例)和波动睡眠不足组(1 403例),三组在人口学及代谢特征上差异显著。Logistic回归显示,调整心血管代谢相关因素后,持续短睡组听力损失风险升高(OR =1.321,P <0.05),且在≥59岁人群中更明显(OR =1.491,P =0.018),<59岁组无统计学意义。结论 持续睡眠短睡轨迹与听力损失显著相关,且在老年人群中风险更高,提示长期睡眠不足可能是老年听力损失的危险因素。
2026, 33 (1): 27-.
鼻咽癌组织驱动蛋白超家族18B、20A与上皮间质转化标志物及临床病理特征和预后的关系
白芸芸, 贾乐, 陈福权
摘要228)      PDF (947KB)(24)   
目的 探讨鼻咽癌组织驱动蛋白超家族(KIF)18B、20A与上皮间质转化(EMT)标志物以及临床病理特征和预后的关系。方法 选取2017年7月~2019年5月榆林市中医医院耳鼻咽喉科病理诊断为鼻咽癌的116例鼻咽活检肿瘤组织,以116例鼻咽慢性黏膜炎症患者的鼻黏膜活检组织作为对照,比较鼻咽癌组织和鼻咽慢性黏膜炎症组织中KIF18B、KIF20A以及EMT标志物上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、扭曲蛋白(Twist)表达,分析鼻咽癌组织中KIF18B、KIF20A表达与EMT标志物表达及临床病理特征的关系。随访5年,采用Kaplan-Meier法及多因素Cox回归分析KIF18B、KIF20A表达与鼻咽癌患者预后的关系。结果 鼻咽癌组织的KIF18B、KIF20A、Vimentin、Twist阳性表达率分别为55.17%、42.24%、20.69%、26.72%,高于鼻咽慢性黏膜炎症组织的13.79%、9.48%、4.31%、5.17%,鼻咽癌组织的E-cadher in阳性表达率为68.10%,低于鼻咽慢性黏膜炎症组织的91.38%(P <0.05)。KIF18B、KIF20A与E-cadherin表达呈负相关(r s=-0.439、-0.432,P 均<0.05),KIF18B、KIF20A与Vimentin(r s=0.418、0.456,P 均<0.05)、Twist呈正相关(r s=0.427、0.427,P 均<0.05)。KIF18B、KIF20A的阳性表达率在低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅵa期、临床疗效疾病稳定(SD)/疾病进展(PD)高于中高分化、无淋巴结转移、Ⅰ~Ⅱ期和完全缓解(CR)/部分缓解(PR),差异有统计学意义(P <0.05)。随访5年共4例患者失访,随访成功率为96.55%(112/116),死亡31例,5年总体生存率为72.32%(81/112)。KIF18B、KIF20A阳性表达鼻咽癌患者的5年累积生存率低于KIF18B、KIF20A阴性患者(P <0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅵa期(HR=1.154,95%CI :1.018~1.308)、临床疗效SD/PD(HR=1.287,95%CI :1.132~1.654)、KIF18B(HR=1.823,95%CI :1.332~2.493)和KIF20A阳性表达(HR=2.110,95%CI :1.460~3.051)均是影响鼻咽癌患者预后的独立危险因素(P <0.05)。结论 鼻咽癌组织中KIF18B、KIF20A异常高表达,两者阳性表达与EMT、肿瘤恶性进展及预后关系密切,KIF18B、KIF20A阳性表达患者生存期更短。
2025, 32 (1): 1-.
吲哚菁绿联合近红外自体荧光在甲状旁腺病变识别中的应用初探
刘瑞鸣, 李祖飞, 钟琦, 张洋, 黄志刚, 黄俊伟
摘要198)      PDF (783KB)(23)   
目的 探索吲哚菁绿联合近红外自体荧光成像技术在原发性甲状旁腺功能亢进(primary hyperparathyroidism,PHPT)手术中识别病变甲状旁腺的应用价值。方法 收集就诊于首都医科大学附属北京同仁医院的40例PHPT患者数据,所有患者均行手术治疗切除病变甲状旁腺。其中吲哚菁绿给药组10例,非给药组30例。采用近红外自体荧光成像仪进行图像采集,ImageJ软件进行荧光强度分析。结果 吲哚菁绿给药组的病变甲状旁腺荧光强度显著高于非给药组(142.7±23.7 vs.94.5±31.4,t =-4.434,P =0.000);病变甲状旁腺/甲状腺荧光比值显著高于非给药组(1.6±0.3 vs. 1.2±0.4,t =-3.162,P =0.004)。非给药组甲状旁腺荧光强度与术前血钙(r =0.029,P =0.088)及术前甲状旁腺激素(PTH)(r =-0.142,P =0.455)均无相关性,给药组甲状旁腺荧光强度与术前血钙(r =0.206,P =0.568)及术前PTH(r =0.160,P =0.658)均无相关性。非给药组近红外光检出率为53.3%(16/30),给药组近红外光检出率为100%(10/10)。非给药组的平均检出时间为(71.0±16.9)min,给药组的平均检出时间为(52.7±11.1)min,差异比较有统计学意义(t =3.187,P =0.003)。结论 吲哚菁绿联合近红外自体荧光成像技术有助于在PHPT手术治疗中识别病变甲状旁腺。
2024, 31 (9): 545-.
缺氧环境下GAPDH通过抑制铁死亡增强喉鳞状细胞癌恶性生物学行为和顺铂耐药性研究#br#
岑瑞祥, 刘丹, 彭聪, 万浪
摘要263)      PDF (2487KB)(23)   
目的 探讨缺氧环境下磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)调控喉鳞状细胞癌(简称喉癌)铁死亡、恶性生物学行为和顺铂耐药性中的作用。方法 人喉癌细胞系Hep-2和TU212在体外进行培养,分别在缺氧(1% O2)和常氧(21% O2)条件下进行无血清培养。Hep-2细胞分为5个实验组:DMSO对照组、Erastin组、缺氧+Erastin组、缺氧+Erastin+NC-GAPDH组和缺氧+Erastin+si-GAPDH组,以研究细胞在不同实验条件下的反应。使用定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白免疫印迹法(WB)分析各组细胞系GAPDH的mRNA和蛋白表达水平。细胞计数试验(CCK-8)、集落形成实验和Transwell侵袭实验用于评估各组喉癌细胞活力、增殖能力和侵袭能力。CCK-8实验用来测定细胞对不同浓度顺铂(5、15、20 μg/ml)的耐药性。试剂盒法评估细胞内丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的水平。WB检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)蛋白表达水平。同时,使用Fe2+探针和活性氧簇(ROS)荧光探针检测细胞内Fe2+含量及ROS水平,透射电子显微镜用于观察线粒体形态变化,以评估铁死亡发生情况。结果 与常氧条件相比,缺氧显著增强Hep-2和Tu212细胞中GAPDH mRNA和蛋白的表达(P 均<0.05),在缺氧条件下,细胞的集落形成数量、迁移数量以及在15 μg/ml和20 μg/ml顺铂处理下的细胞活力显著上升,均高于常氧组(P 均<0.05)。GAPDH被沉默后,缺氧引起的这些增强效果得到逆转。在常氧条件下,与DMSO对照组相比,Erastin处理显著降低Hep-2细胞的集落形成数量、迁移数量以及在15 μg/ml和20 μg/ml顺铂处理下的细胞活力(P 均<0.05),但在缺氧条件下,Erastin的抑制作用有所减弱。此外,缺氧+Erastin+si-GAPDH组的集落形成数、迁移数以及在15 μg/ml和20 μg/ml顺铂处理下的细胞活力显著低于缺氧+Erastin+NC-GAPDH组(P 均<0.05)。结论 在缺氧环境下,沉默GAPDH能够逆转喉癌细胞铁死亡抑制过程,进而抑制其恶性生物学行为和顺铂耐药性。
2024, 31 (10): 613-.