中国耳鼻咽喉头颈外科

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Na-K-2Cl联合转运子1与钠钾交换ATP酶在C57BL/6J小鼠中的表达

  

  • 出版日期:2019-02-28 发布日期:2019-03-07

  • Online:2019-02-28 Published:2019-03-07

摘要: 目的 内耳电解质紊乱与听力障碍有关,包括年龄相关性听力障碍。Na-K-2Cl联合转运子1(Na-K-2Cl co-transporter 1,NKCC1)和钠钾交换ATP酶(Na-K-ATPase)的表达随年龄改变,由此分析与年龄相关性聋的发展关系。方法 通过听性脑干反应(ABR)检测青年和老年C57BL/6J小鼠听力水平,反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RTPCR)和蛋白质印迹(western blotting,WB)方法检测NKCC1和Na-K-ATPase在耳蜗的表达水平,使用NKCC1抑制剂呋塞米、Na-K-ATPase抑制剂乌巴因对C57BL/6J小鼠离子转运蛋白进行抑制。结果 频率8、16和32 kHz时,老年C57BL/6J小鼠ABR反应阈值分别为(75±10)、(78±26)和(81±14)dB SPL。RT-PCR显示老年组的NKCC1和Na-K-ATPase的mRNA相对表达水平下降,分别是青年对照组0.52±0.06和0.35±0.04倍,两组分别比较差异有统计学意义(t =7.466和16.11,P 均<0.05);WB显示老年组的NKCC1和Na-K-ATPase的蛋白相对表达水平下降,分别是
青年对照组0.79±0.02和0.68±0.05倍,两组分别比较差异有统计学意义(t =8.857和6.771,P 均<0.05)。对NKCC1和Na-KATPase进行抑制后,频率8、16和32 kHz时,给药组青年小鼠ABR阈值分别为(50±17)、(53±21)和(55±17)dB SPL以及(56±6)、(70±17)和(73±6)dB SPL。结论 C57BL/6J小鼠实验证明NKCC1和Na-K-ATPase可能与小鼠年龄相关性听力损失相关。

关键词: 动物实验, 老年性聋, 钠钾交换ATP酶, 钾通道