中国耳鼻咽喉头颈外科 ›› 2023, Vol. 30 ›› Issue (10): 646-.
GATA-3小干扰RNA载体对变应性鼻炎小鼠外周血单个核细胞中辅助性T细胞亚群功能的体内调节机制#br#
摘要： 目的 研究RNA干扰（RNA interference，RNAi）介导的GATA-3小干扰RNA载体（si-GATA-3）对变应性鼻炎（AR）小鼠外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）中辅助性T细胞1（T-helper 1，Th1）和Th2功能的调节作用。方法 构建si-GATA-3，用卵清蛋白构建BALB/c AR模型，si-GATA-3组、si-NC组（无目标基因小干扰RNA的空白对照组）分别用si-GATA-3和si-NC腹腔注射干预AR小鼠，AR组和正常对照组用等量的生理盐水干预。干预结束抽取其外周血，分离PBMCs和血浆。分别用荧光定量PCR和Western blot技术检测PBMCs中GATA-3和T-bet mRNA及其相应蛋白的表达量；用ELISA技术检测血浆中白细胞介素4（IL-4）和干扰素γ（IFN-γ）的含量。结果 si-GATA-3滴度为5×108 TU/ml。成功制备BALB/C小鼠AR模型。si-GATA-3能明显改善AR小鼠的症状。si-GATA-3组PBMCs中GATA-3 mRNA表达明显低于AR组和si-NC组（P <0.01），AR组和si-NC组明显高于正常对照组（P＜0.01）。PBMCs中GATA-3蛋白和血浆中IL-4的表达量与GATA-3 mRNA表达相似。si-GATA-3组PBMCs中T-bet mRNA及其蛋白的相对表达均明显高于AR组和si-NC组（P <0.01），AR组和si-NC组二者均明显低于对照组（P＜0.01）。si-GATA-3组血浆中IFN-γ的表达量高于正常对照组（P＜0.05）；AR组与si-NC组中IFN-γ的表达量均明显高于正常对照组和si-GATA-3组（P＜0.01）。结论 si-GATA-3能有效改善AR小鼠症状，下调AR小鼠PBMCs中Th2细胞中GATA-3 mRNA、GATA-3蛋白和IL-4的表达，同时上调Th1细胞中T-bet mRNA和T-bet蛋白的表达，纠正Th2/Th1的免疫失衡。