摘要： 目的 探究下咽癌患者血清源性外泌体中角蛋白8（KRT8）小干扰RNA（si-KRT8）对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株5-氟脲嘧啶（5-FU）化疗敏感性的影响和作用机制。方法 收集下咽癌患者肿瘤组织以及治疗后耐药患者的血清、肿瘤组织以及癌旁组织。构建FaDu的5-FU耐药细胞株（FaDu/R）用于后续实验。超速梯度离心法分离患者血清中的外泌体并利用透射电镜及蛋白质免疫印迹（Western blot，WB）技术进行鉴定，利用电转染技术将si-KRT8封装至外泌体（Exosome@si-KRT8）中，后续用于处理细胞。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）及WB方法检测KRT8分别在不同组织、电转染后外泌体及不同处理条件下FaDu细胞中的表达水平。CCK-8、原位末端转移酶标记技术及迁移侵袭技术和WB检测Exosome@si-KRT8对FaDu/R细胞活力、凋亡及上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）的影响。结果 下咽癌耐药组织及FaDu/R细胞中的KRT8表达水平相较于癌旁组织和肿瘤组织以及正常FaDu细胞均升高（t =15.79，P <0.01）。分离的患者血清外泌体呈现双层膜结构，且CD63和TSG101蛋白均表达，电转染si-KRT8后，外泌体中KRT8表达量下降（t =6.70，P <0.01）。Exosome@si-KRT8能够抑制FaDu/R细胞中KRT8的蛋白表达水平（t =123.50，P <0.01）。与5-FU组及5-FU+Exosome组相比，Exosome@si-KRT8能够抑制FaDu/R细胞的活力（t =17.07，P <0.01），促进其凋亡水平，并且抑制FaDu/R细胞耐药相关蛋白的表达（t P-gp=103.20，t MDR1=238.60，P <0.01）。此外，Exosome@si-KRT8还能抑制FaDu/R细胞的迁移侵袭能力（t =42.30，t =122.00，P <0.01），并在促进E-cadherin的表达同时抑制N-cadherin的表达水平（t =130.80，t =83.90，P <0.01）。结论 下咽癌患者血清来源的外泌体封装si-KRT8能够增强下咽癌细胞的化疗敏感性，且其作用机制可能与抑制细胞上皮间质转化有关。