甲状腺髓样癌家系RET基因点突变质粒及稳定细胞系构建

摘要/Abstract

摘要： 目的　构建中国大陆甲状腺髓样癌RET基因常见突变位点的质粒并验证其表达。方法　分析中国大陆甲状腺髓样癌家系RET基因，进行RET基因外显子高通量“二代”测序分析。体外构建RET基因相应位点突变并研究在NIH3T3细胞中的表达水平。结果　通过对野生型RET质粒进行点突变PCR、克隆测序后，成功获得相应位点点突变慢病毒质粒。经过慢病毒感染NIH3T3细胞，Western Blot验证目的基因为稳定表达。结论　成功构建了载有RET基因突变的稳定细胞系，为研究RET不同位点突变提供了良好平台。

关键词: 甲状腺肿瘤, 基因, 突变, 质粒, 慢病毒感染, 细胞系, 信号通路

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