中国耳鼻咽喉头颈外科

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siRNA下调β-catenin基因对喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

  

  • 出版日期:2015-07-28 发布日期:2015-08-04

  • Online:2015-07-28 Published:2015-08-04

摘要： 　目的　应用siRNA干扰β-catenin基因在喉癌Hep-2细胞中的表达，探讨下调β-catenin基因后对喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法 RNA干扰技术干扰喉癌Hep-2细胞β-catenin基因的表达，实时荧光定量PCR和Western-blot方法进行干扰效果鉴定；采用MTT法检测细胞增殖能力、流式细胞仪AnnexinPI法检测细胞凋亡率、transwell法观察细胞的迁移侵袭能力。结果 实时荧光定量PCR检测表明β-catenin-siRNA干扰组mRNA相对表达量较空白对照组下降达70%，Western blot结果显示干扰组β-catenin蛋白相对表达量为（0.545±0.111），较空白对照组（1.507±0.139）和阴性对照组（1.429±0.089）明显下降（F =21.859，P <0.05）。细胞增殖实验证实靶向干扰β-catenin表达导致喉癌细胞增殖明显受抑制。流式细胞仪AnnexinPI法检测说明，β-catenin-siRNA干扰组凋亡率（18.80±0.81）%与空白对照组（8.6±0.68）%和阴性对照组（9.03±0.26）%相比明显增加（F =253.93，P <0.01）。Transwell侵袭实验表明β-catenin-siRNA干扰组穿过Matrigel到达下室的平均细
胞数较空白对照组和阴性对照组均明显减少（F =136.20，P <0.01）。结论　干扰β-catenin基因在喉癌Hep-2中的表达可抑制喉癌Hep-2细胞的增殖和侵袭能力，促进喉癌Hep-2细胞的凋亡。

关键词: 喉肿瘤, RNA, 小分子干扰, 细胞增殖, &beta, -catenin