中国耳鼻咽喉头颈外科 ›› 2023, Vol. 30 ›› Issue (2): 84-.

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微小RNA通过SIRT1调控小鼠耳蜗老化HEI-OC1细胞凋亡的研究

  

  • 出版日期:2023-02-28 发布日期:2023-03-15

  • Online:2023-02-28 Published:2023-03-15

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摘要： 目的　构建小鼠耳蜗毛细胞株HEI-OC1（house ear institute-organ of Corti 1）老化模型，探索微小RNA-96（miR-96）可否通过SIRT1调控老化HEI-OC1凋亡。方法　CCK-8筛选D-半乳糖浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡，Western blot检测p53、p38、caspase-3蛋白表达。qRT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达，Western blot检测SIRT1蛋白表达。miR-96模拟物转染HEI-OC1细胞，qRT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达，Western blot检测SIRT1、caspase-3蛋白表达。结果　HEI-OC1细胞在15 mg/ml D-半乳糖条件下培养72 h后，凋亡较对照组显著增加（P<0.01），且p53、p38（P<0.05）及caspase-3（P<0.0001）蛋白表达明显增加。老化组miR-96与SIRT1 mRNA和蛋白表达均明显减低（P<0.05）。miR-96过表达后，SIRT1 mRNA及蛋白较对照组表达升高，Caspase-3蛋白表达降低（P<0.05）。结论　老化HEI-OC1细胞中miR-96、SIRT1 mRNA与蛋白的表达均下降。miR-96可通过上调SIRT1抑制HEI-OC1细胞的凋亡。miR-96、SIRT1可能成为保护老年性聋耳蜗毛细胞的作用靶点。

关键词: 老年性聋, 细胞凋亡, miR-96, SIRT1, HEI-OC1