中国耳鼻咽喉头颈外科 ›› 2024, Vol. 31 ›› Issue (12): 749-.

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下调SMAD2/3表达对鼻咽癌细胞放疗和化疗敏感性的影响研究

  

  • 出版日期:2024-12-28 发布日期:2025-02-13

  • Online:2024-12-28 Published:2025-02-13

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摘要： 目的　探讨下调转录因子SMAD2/3的表达对鼻咽癌细胞放疗和化疗敏感性的影响及可能的分子机制。方法　通过组织免疫荧光染色检测SMAD2和SMAD3蛋白在鼻咽癌组织和癌旁组织中的表达水平，Western blot和qRT-PCR检测其在人鼻咽癌细胞系（CNE-2、5-8F、HONE1、HK-1）和人正常鼻咽黏膜上皮细胞（HNEpC、NP69）中的表达水平。通过慢病毒转染细胞的方法构建稳定敲低SMAD2/3的CNE-2细胞株（shSMAD2/3组）和其对照细胞株（shSMAD2/3-NC组）。对转染后的细胞分别进行4 Gy照射、10 μmol/L顺铂化疗、4 Gy照射+10 μmol/L顺铂化疗联合处理，通过克隆形成试验检测细胞增殖活性，划痕试验检测细胞迁移能力，Transwell试验检测细胞侵袭能力，Western blot检测PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平。加入PI3K激动剂740 Y-P进行回复实验。结果　SMAD2和SMAD3蛋白在鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞系中均高水平表达。与shSMAD2/3-NC组细胞相比，shSMAD2/3组细胞对放疗和化疗敏感性均显著增强，细胞增殖、细胞迁移和侵袭能力均受到显著抑制，PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平显著降低（P 均<0.05）。740 Y-P显著提升shSMAD2/3组细胞PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平，有效逆转SMAD2/3敲低对细胞活性的抑制，降低细胞对放疗和化疗敏感性（P 均<0.05）。结论  SMAD2/3在鼻咽癌中高表达，下调SMAD2/3表达通过降低PI3K/AKT/mTOR通路磷酸化水平而增加鼻咽癌细胞株对放疗和化疗的敏感性。

关键词: 鼻咽癌, 转录因子, 化疗, 放疗, SMAD2, SMAD3, PI3K