中国耳鼻咽喉头颈外科 ›› 2026, Vol. 33 ›› Issue (3): 136-.

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脐带间充质干细胞来源外泌体的规模化制备及鼻腔递送研究

  

  • 出版日期:2026-03-28 发布日期:2026-06-29

  • Online:2026-03-28 Published:2026-06-29

摘要: 目的 探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)来源外泌体(Exosomes)的规模化制备方法,并观察外泌体经鼻递送后的局部动态分布。方法 采用组织块贴壁法分离培养UCMSCs,使用无血清培养基进行扩增。收集细胞上清液,分别通过传统的超速离心法和超声纳滤法分离纯化外泌体。利用透射电镜、纳米流式、纳米颗粒跟踪分析(NTA)及Western blot对产物进行鉴定。利用DiR荧光染料标记外泌体(DiR-exo),通过小鼠滴鼻给药,使用活体成像系统观察不同时间点DiR-exo在小鼠鼻腔的分布情况。结果 成功建立hUC-MSCs无血清培养体系;超声纳滤法和超速离心法所得外泌体均呈典型双层椭圆囊泡状结构;外泌体阳性标志物CD9、TSG101均有条带,且阴性标志物Calnexin均未表达;滴鼻后小鼠鼻腔可见持续荧光信号,6 h后仍可检测到明显分布。结论 通过超声纳滤法可实现人脐带间充质干细胞来源外泌体的高效制备;荧光标记的外泌体经鼻给药后在小鼠鼻腔可检测到稳定信号,为未来外泌体制剂研发及转化提供技术参考。

关键词: 干细胞, 超速离心法, 投药, 鼻内, 活体显微镜检查, 人脐带间充质干细胞, 外泌体, 超声纳滤法