摘要： 目的 褪黑素是一种具有广谱抗癌效应的天然激素，可增强传统化疗的疗效。本研究探讨阿霉素与褪黑素联合应用对头颈鳞状细胞癌（HNSCC）细胞系的影响。方法 采用MTT法检测褪黑素和阿霉素对HNSCC细胞系TU686和CAL-27增殖的影响；使用2'，7'-二氯二氢荧光素-双乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测褪黑素和阿霉素对HNSCC细胞系中活性氧（ROS）表达水平的影响；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定MEL和阿霉素对HNSCC细胞系中8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-oxodG）表达水平的影响；通过Western blot法分析褪黑素和阿霉素对HNSCC细胞系中γ-H2AX蛋白表达水平的影响；基于分光光度法评估褪黑素和阿霉素对HNSCC细胞系中抗氧化酶活性的影响；采用ELISA细胞死亡检测试剂盒检测褪黑素和阿霉素对HNSCC细胞系中细胞凋亡情况的影响。结果 MTT实验显示在HNSCC细胞系中褪黑素能够显著促进阿霉素的细胞毒性作用（tTU686=13.51，tCAL-27=17.580，P均<0.05）。褪黑素和阿霉素联合应用可使HNSCC细胞内ROS水平显著升高（FTU686=89.984，FCAL-27=102.853，P均<0.05），而抗氧化酶表达水平显著降低（TU686：过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽-S-转移酶、超氧化物歧化酶的F值分别为176.035、34.662、20.260、120.105、184.254，P均<0.05；CAL-27：过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽-S-转移酶、超氧化物歧化酶的F 值分别为96.801、177.398、97.849、102.750、186.608，P均<0.05）。且联合应用也可以显著提高HNSCC细胞中8-oxodG（FTU686=200.078，FCAL-27=663.982，P均<0.05）和γ-H2AX（FTU686=192.500，FCAL-27=285.700，P均<0.01）的表达水平。此外，与褪黑素或阿霉素单独处理的HNSCC细胞相比，褪黑素的联合应用能够使HNSCC细胞中阿霉素诱导的细胞凋亡能力明显增强（FTU686=2718.253，FCAL-27=5185.334，P均<0.01）。结论 褪黑素和阿霉素联合应用可以增强对HNSCC细胞的毒性作用，提高细胞内ROS水平，诱导DNA氧化损伤，降低细胞抗氧化防御能力，从而有效诱导HNSCC细胞凋亡。这种联合治疗可能成为一种新的治疗方案，有望提高HNSCC患者的临床治疗效果。